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酸堿共存的多種化合物的分離，在方法開發時，經常會出現酸保留峰型良好時，堿性成分峰型保留不理想，堿性成分保留峰型滿意時，酸性成分的峰型與保留又不理想。在這種情況下，可以選擇離子對試劑來增加其中酸或堿的保留，再選擇合適的流動相pH值及有機相比例，使所有物質均能分離并都有良好的峰型。

壬二酸、苦參堿的分離：

色譜柱：UItimate^? Polar RP，4.6×250mm，5μm。

檢測波長：220nm；

柱溫: 40℃；

流速: 1.0mL/min；

進樣量：20μL。

在液相色譜中，pH值對酸堿成分的保留與峰型有很大的影響，pH降低，酸保留增強，堿保留減弱；反之，隨著pH值增大，酸保留減弱，堿保留增強。因此對于酸堿樣品，選擇合適的pH值至關重要。

在這個案例中，壬二酸為酸性成分，苦參堿為堿性成分，三氟乙酸具有弱離子對效果，可以適當增加苦參堿的保留。而0.1%三氟乙酸的pH在2.0-2.5之間，壬二酸在酸性條件下保留較強，采用梯度洗脫的方式，使兩個成分的峰型和保留均能達比較滿意的峰型與保留。